綠色植物中葉綠素含量是測定植物所需氮含量的重要因素，是植物進(jìn)行光合作用的關(guān)鍵因素，因此對植物的生理學(xué)研究也是個(gè)重要的考核指標。葉綠素測定儀通過(guò)測量葉片在兩種波長(cháng)范圍內的透光系數來(lái)確定葉片當前葉綠素的相對數量,也就是在葉綠素選擇吸收特定波長(cháng)光的兩個(gè)波長(cháng)區域，根據葉片透射光的量來(lái)計算測量值。

葉綠素測定儀的測定原理是根據葉綠體色素提取液對可見(jiàn)光譜的吸收，利用分光光度計在某一特定波長(cháng)測定其吸光度，即可用公式計算出提取液中各色素的含量。根據朗伯—比爾定律，某有色溶液的吸光度A與其中溶質(zhì)濃度C和液層厚度L成正比，即A=αCL式中：α比例常數。當溶液濃度以百分濃度為單位，液層厚度為1cm時(shí)，α為該物質(zhì)的吸光系數。各種有色物質(zhì)溶液在不同波長(cháng)下的吸光系數可通過(guò)測定已知濃度的純物質(zhì)在不同波長(cháng)下的吸光度而求得。

若測定葉綠體色素混合提取液中的葉綠素a、b和類(lèi)胡蘿卜素的含量，只需測定該提取液在三個(gè)特定波長(cháng)下的吸光度A，并根據葉綠素a、b及類(lèi)胡蘿卜素在該波長(cháng)下的吸光系數可求得其濃度。在測定葉綠素a、b時(shí)為了排除類(lèi)胡蘿卜素的干擾，通常用單色光的波長(cháng)選擇葉綠素在紅光區的大吸收峰。